Какие существуют виды грунтовок | Эксперты отделки

Гусевский Андрей Анатольевич

Строительные грунтовки – виды марки Плитонит

Чем лучше подготовлено основание, тем качественнее и долговечнее получится его отделка. Это правило известно всем строителям.
А одним из основных и самых важных этапов подготовки является грунтование. Что это такое, зачем необходимо и какие виды грунтовки существуют, расскажем в этой статье.

Содержание статьи

Роль грунтовки в подготовке поверхности

Любая поверхность, нуждающаяся в отделке, будь то штукатурка, дерево, металл, кирпич или бетон, требует придания ей определенных свойств, обеспечивающих хорошее сцепление с последующим слоем. Если она рыхлая, потрескавшаяся, слишком гладкая или предрасположена к чрезмерному впитыванию влаги, то ни краска, ни шпаклевка, ни прочие покрытия и смеси держаться на ней не будут.
Именно для устранения таких свойств, а также для придания основанию повышенной устойчивости к внешним воздействиям, и используются грунтовки(см. Для чего нужна грунтовка: технологические нюансы отделочных работ) – виды таких составов весьма разнообразны, что позволяет выбрать тот, который позволит решить весь комплекс задач, требуемый в конкретной ситуации.

На загрунтованную поверхность лучше ложится краска, обойный и плиточный клей

Для справки. Например, грунтовка может защитить дерево от гниения и поражения жучками, метал – от коррозии, а стены во влажных помещениях – от распространения плесени.

Кроме того, слой грунтовки обеспечивает равномерное наложение и распределение отделочных составов по поверхности, уменьшает их впитываемость, облегчает работу. Одним словом, не приходится сомневаться в том, что в большинстве случаев просто необходима грунтовка – какая лучше, это другой вопрос, в котором мы и попробуем разобраться.

Как правильно выбрать грунтовку

Чтобы понять, какая грунтовка вам нужна, нужно знать, какой она вообще бывает. Если говорить про виды грунтовка может различаться по области применения и по составу, материалу основы. Они могут быть уже готовыми к применению, концентрированными или в виде сухих смесей, требующих разведения водой или растворителем своими руками.
Если в недавнем прошлом выбор был не особенно велик, то сегодня появилось множество специализированных составов, в разнообразии которых немудрено запутаться. Общим для них является наличие в составе веществ, при высыхании образующих на обрабатываемой поверхности прочной пленки. Это могут быть масла, различные виды клея, натуральные и синтетические смолы и т.д.

Благодаря большому ассортименту, можно выбрать средство для любых целей

Кроме того, в грунтовки могут вводиться различные добавки – пигменты для контроля за качеством нанесения, ускорители высыхания, фунгициды для предотвращения развития плесени и т.д. Но классифицируются они прежде всего по материалу основы.

Классификация по основе

Состав наносимой на основание смеси должен соответствовать материалу, улучшать его свойства. Также следует учитывать и то, под какое покрытие оно готовится.
Выбирая, какая грунтовка лучше, в первую очередь обращайте внимание на её основу:

• Грунтовки на минеральной основе, основным связующим компонентом в которых является цемент, используются для предварительного выравнивания и первичной обработки поверхностей из бетона, керамзитных и газосиликатных блоков, кирпича.
• Составы на основе акриловых сополимеров можно считать универсальными, они подходят как для минеральных оснований, в том числе оштукатуренных и зашпаклеванных, так и для деревянных, включая древесно-стружечные и древесно-волокнистые плиты. Их основные достоинства – отсутствие запаха, экологичность, короткое время высыхания и низкая цена.

Обратите внимание. Акриловый грунт не рекомендуется применять к металлическим поверхностям. Он содержит в себе воду, которая вызывает коррозию и появление ржавчины.

• Грунтовки на алкидных связующих применяются для обработки металлов и дерева(см.Грунтовка дерева – особенности процесса). Поверхность древесины под её воздействием вспучивается и становится восприимчива к любым отделочным составам.
  Для грунтовки металлов такие составы нужно выбирать в зависимости от вида будущего покрытия. Если основой является хромат цинка, они обладают широким спектром применения, а вот грунтовка на фосфате цинка станет отличной защитой против коррозии под алкидные краски. Для минеральных поверхностей алкидная грунтовка не подходит.

Антикоррозийная алкидная грунтовка

• Также для обработки дерева и металла используют фенольные и глифталевые составы. Последние применяются только для внутренних работ в сухих помещениях.
• Поливинилацетатная грунтовка имеет достаточно узкий спектр применения и является лучшей подложкой под поливинилацетатные краски. Это самый быстросохнущий состав из всех существующих – для полного высыхания слоя достаточно получаса.
• Перхлорвиниловые составы достаточно универсальны – подходят как для металлических, так и для минеральных (кирпичных, бетонных, оштукатуренных) оснований. Легко наносятся, быстро сохнут даже при достаточно невысокой температуре, но инструкция запрещает использовать их для внутренних работ из-за высокой токсичности.
• Вредные вещества содержатся и в полистирольных грунтовках, применяемых для нанесения на деревянные и оштукатуренные поверхности, поэтому и они должны использоваться только снаружи или в хорошо проветриваемых помещениях.

Также в качестве грунтовочного слоя могут использоваться клеевые составы. Часто его роль выполняет разведенный водой клей ПВА или любой обойный клей.
Конечно, они способны ограничить впитывающие свойства поверхности, увеличить её адгезию, но совершенно не справятся с другими задачами – укреплением, защитой от появления цветных пятен, обеспечением водоотталкивающих свойств и т.д.

Клей ПВА – самый бюджетный вариант грунтовки

Поэтому лучше не экономить на таком материале, как качественная грунтовка виды которой вы теперь знаете.

Классификация по применению

Если с материалом основания все понятно, ясно, состав на каком связующем будет наиболее эффективен в том или ином случае, то теперь нужно поговорить о состоянии обрабатываемой поверхности и тех условиях, в которых она будет эксплуатироваться. Это очень важный момент при определении, какая грунтовка лучше – какая хуже.
Итак:

• Если обрабатываемая поверхность непрочная, осыпающаяся, пористая, легко впитывает в себя влагу, к ней нужно применить грунтовку глубокого проникновения. Она укрепит основание на несколько сантиметров в глубину, уменьшит впитывающую способность, позволит сэкономить на последующей отделке.

На фото – одна из самых популярных на нашем рынке грунтовка Церезит

• Примерно такими же свойствами обладают укрепляющие грунтовки, но проникают на меньшую глубину. Они хороши, например, для подготовки под отделку гипсокартона – пропитывают и скрепляют верхние бумажные слои, нормализуют впитывающие свойства материала.
• Если основание не впитывает влагу, является прочным, плотным и очень гладким (кафель, стекло, пластик и т.п.), необходимо повысить его способность к сцеплению с отделочным слоем. Для этого применяют адгезионную грунтовку.
• Грунтовки специального назначения предназначены для защиты поверхностей от вредных внешних воздействий. В них вводятся специальные добавки, способные уменьшить влияние вредных факторов.
  Например, если есть риск образования грибка, применяют антисептические составы(см.Антигрибковая грунтовка – назначение и характеристики материала), если необходимо защитить металл от ржавчины – антикоррозийные и т.д.

Одним словом, при выборе средства нужно смотреть, чтобы оно подходило к материалу поверхности, нивелировало его негативные свойства, создавало хорошую основу для отделочного слоя и служило защитой от вредных факторов.

Заключение

В этой статье мы не затронули вопрос о правилах и способах нанесения грунтовки. Об этом подробно рассказано в других материалах сайта и на видео.
Что же касается выбора, то сделать его будет легко и без специальных знаний – вся информация о назначении, свойствах и области применения всегда указывается на упаковке.

виды, назначение и применение Кенгуру.Советы

Как известно, грунтовка
– специализированный состав на водной
основе, который наносят на поверхность перед ремонтом. С помощью нее выравнивают стены, устраняют мелкие,
фактически незаметные шероховатости. Проникая глубоко, грунтовка заполняет появившиеся трещины, микропоры и
помогает избавиться от них.

Виды грунтовок и их применение

На отечественном рынке есть огромное количество грунтовых составов, которые различаются по своим свойствам и
характеристикам, а также характеру применения. Принято выделять следующие виды грунтовок:

1. Акриловая или эмульсионная.

   Ее можно считать универсальной и применять на абсолютно любой поверхности за исключением металлической.
   Для кирпича,
   гипсокартона,
   бетона и дерева,
   шпаклевки и
   штукатурки
   она подойдет без тени сомнения.

   Среди сильных качеств этого грунта: простота использования, достаточно высокая степень высыхания (от
   двух до четырех часов) и отсутствие традиционно сильного запаха токсинов.

2. Состав на алкидных смолах.

   Это средство обладает антикоррозийными свойствами. Его часто наносят на деревянные и железные поверхности
   (не применяется в отношении минеральных материалов). Грунтовка придает стойкости покрытию, увеличивая срок
   службы. Сохнет заметно дольше, чем акриловый грунт (от 10 до 16 часов).

3. Полистирольные грунтовые вещества.

   Как правило, применяются на обработанных деревянных основаниях. Не рекомендуется использовать при
   внутренней отделке в квартирах из-за повышенного содержания токсичных веществ. Требует очень мало времени
   для высыхания (около получаса). Идеально подходит для наружных работ.

4. Глифталевые грунтовки.

   Подходят для обработки металла и дерева при отсутствии высокого уровня влажности. Зачастую грунтовка
   используется вместе с эмалевыми
   красками. Имеет
   невысокий уровень токсичности. Высыхает за 24 часа.

5. Фенольные грунтовые составы.

   Покрыть металл или дерево можно этой грунтовкой. Она не только быстро сохнет (всего 8 часов), но и
   обладает высокими антикоррозийными свойствами (предотвращает появление влаги).

6. Поливинилацетные смеси.

   Самая быстросохнущая грунтовка (для высыхания достаточно 30 минут). Используется только в том случае,
   если будет наноситься поливинилацеатная краска. Придает яркость покрытию, наносится на бетон, ГКЛ, кирпич
   и другие материалы.

Грунтовочные составы

Качественная покраска начинается с грунтовки. Грунтовочные составы (грунтовка) — жидкие смеси, в состав которых входят пигменты, наполнители и связующие. Грунтовки отличаются от окрашивающих составов меньшим содержанием пигментов и предназначаются для уменьшения пористости основания, улучшения адезионной и антикоррозионной способности окрашиваемой поверхности.

Грунтовку наносят на поверхности как до выравнивания их шпатлевкой, так и после шпатлевания и шлифования. Составы грунтовок, как и шпатлевок, должны сочетаться с составами чистовых лакокрасочных покрытий. При нанесении нескольких слоев грунтовки в последний слой ее добавляется краска, которой будет окрашиваться поверхность.

При известковом окрашивании по бетону, кирпичу и штукатурке для наружных и внутренних работ применяют известковые грунтовки с мелом, поваренной солью, квасцами. Под клеевые окраски используют грунтовки медно-купоросную и квасцовую, под казеиновые — грунтовки на основе казеинового клея или готовых красок, под окраски силикатными составами — грунтовки, приготовленные на основе жидкого калиевого стекла с мелом, под масляные окраски оштукатуренных деревянных и металлических поверхностей — грунтовки масляные (на основе олифы и растворителя с добавкой до 5% пигмента) и масляно-эмульсионные.

Практически под все виды окрасок используются синтетические грунтовки на основе поливинилацетатной дисперсии или латексов, для чего водоэмульсионные поливинилацетатные или стирол-бутадиеновые окрасочные составы разбавляют водой до рабочей вязкости (в соотношении 1 : 5. ..1 : 6).

Синтетические неводоэмульсионные краски (например, ПХВ) для приготовления грунтовок растворяют или разбавляют в специальных жидкостях (таких, как ксилол) до рабочей вязкости.
Применяют грунтовки как заводского приготовления (т. е. готовые к употреблению): фенольные, глифталевую, пентафталевую, так и приготавливаемые на строительной площадке.

Грунтовка стен и ее назначение.

Грунтовка стен: Немалая часть строителей-новичков не уделяют должного внимания такому процессу как грунтовка стен, которая, по их мнению, является простой тратой денег.

Конечно, грунтовка не может придать помещению какие-то декоративные качества, она выполняет совершенно другие функции. Любителям экономить на строительных материалах, нарушая технологию, нужно знать, что отказ от использования грунтующих составов приводит к потере качества всех видов отделочных покрытий, существенно снижает срок их службы.

Назначение грунтовки:

Итак, для чего собственно требуется покрытие стен грунтовкой? Ее основные функции заключаются в следующем:

1. Повышение адгезии слоев отделки (штукатурки, шпаклевки, обоев, краски). Правильно подобранная грунтовка улучшает прилипание к стене всех этих материалов.
2. Снижение расхода краски, клеевых смесей. Качественная грунтовка может на 20% снизить финансовые расходы на них.
3. Вещества, входящие в состав грунтовки позволяют повысить прочность основания. Особенно это актуально для пористых, рыхлых стен, покрытия которых могут быть легко повреждены. Такое скрепленное основание будет гарантией того, что отделка не отстанет от стены с частью основы.
4. В продаже имеются грунтовки, в состав которых входят фунгицидные добавки. Они позволяют удалить с поверхности стены плесень, грибок, кроме того являются отличным средством профилактики возникновения подобных проблем.
5. Специальные грунтовки белого цвета позволяют получить идеальную основу для нанесения краски любых оттенков.

Учитывая то, что грунтовка стоит сравнительно недорого (на фоне других материалов), ее применение может принести ощутимый экономический эффект.

Классификация грунтовок:

Большую роль играет правильный подбор состава грунтовки, свое влияние оказывает материал, из которого сделаны стены, микроклимат комнаты.

Для помещений с повышенной влажностью, таких как ванные, санузлы, кухни, лучше всего применять составы с высоким уровнем водостойкости. Основным отличием такой грунтовки является образование на обработанной поверхности тонкой пленки, которая выполняет гидроизолирующую функцию. Такая защита препятствует попаданию влаги внутрь стеновых конструкций.

По степени проникновения грунтовки в основание и оказываемому ей действию, различают следующие виды таких составов:

• Грунтовки глубокого проникновения. Они применяются для обработки бетонных, кирпичных стен. Использование таких грунтовок позволяет пропитать практически всю толщину конструкции, очень часто подобные смеси содержат в своем составе и фунгицидные добавки, которые обеспечивают надежную защиту от грибка и плесени.
• Закрепляющие грунтовки применяются на склонных к разрушению и осыпанию поверхностях. Подобная обработка позволяет получить достаточно монолитную поверхность, которая обеспечит длительную эксплуатацию последующих слоев отделочных материалов.
• Грунтовки с высокими адгезивными свойствами могут применяться на достаточно прочных и плотных стеновых материалах. Их основной задачей является именно улучшения прилипания штукатурки, шпаклевки, краски.
• Еще один класс грунтовок — универсальные составы. Они обладают практически всеми качествами описанных выше материалов, правда, все эти свойства выражены менее ярко. Практикуется применение таких грунтовок на стенах со средней впитывающей способностью (капля воды впитается за 5-20 минут).

Из чего делают грунтовку:

Любая грунтовка представляет собой смесь различных компонентов, которые придают ей определенные свойства. По основным компонентам можно выделить две группы составов, применяемых для обработки стен:

1. Грунтовки на минеральной основе. Главным вяжущим компонентом в таких составах являются различные виды цементов, все качества определяются добавками акриловых или алкидных компонентов. Алкидные грунтовки применяются в основном для обработки деревянных поверхностей, а вот акриловые идеально подходят и для оштукатуренных стен, и для гипсокартона.  
2. Грунтовки на полимерной основе в последнее время становятся все более популярными. Такой грунт отличается высокими адгезивными качествами, может применяться в различных условиях, обладает устойчивостью к температурным перепадам. Полимерные грунтовки применяются как универсальные вещества, они могут наноситься на различные типы поверхности. Чаще всего в продаже можно встретить составы на основе эпоксидных смол и полиуретана, в отделке оштукатуренных стен такие грунтовки применяются незначительно.

Правила нанесения грунтовки:

Покрывая стену грунтовкой, следует придерживаться целого ряда правил, от соблюдения которых будет зависеть эффективность ее работы.

• Покупая грунтовку необходимо обращать внимание на  срок годности. От составов, у которых он заканчивается, лучше отказаться, качество грунтовки может быть не на уровне.
• В первую очередь необходимо подготовить поверхность. Со стены должна быть удалена вздувшаяся и отслоившаяся штукатурка (или другие отделочные слои).
• Все имеющиеся трещины должны быть углублены и расширены.
• Наносится грунтовка при помощи валика и обычной кисти, при этом нельзя допускать пропусков, любая необработанная поверхность приведет к отрицательному результату.
• Если поверхность обладает сильными впитывающими качествами, понадобится повторное нанесение грунтовки.
• Нанесение последующих отделочных материалов допускается только после высыхания грунта. Обычно на это уходит несколько часов (период может меняться в зависимости от температуры и влажности в помещении).

Грунтовка под штукатурку:

Кирпичные, каменные, бетонные стены необходимо в первую очередь обработать грунтом глубокого проникновения, например, PRIM-SM. Если требуется обработка для удаления плесени или грибка можно использовать грунтовку ANTI-HUMIDITE или другие похожие составы.

Следует помнить о том, что при многослойной штукатурке и шпаклевке, грунтовать необходимо каждый слой, это сделает покрытие более качественным.

Грунтовка под покраску:

Поверхность, которую предполагается покрасить, необходимо грунтовать специальными составами. В основном это объясняется следующей причиной — через большинство видов красок может проявиться цвет основы. Поэтому лучше всего, если применяемая грунтовка будет иметь белый цвет или его оттенки, такая поверхность будет нейтральной для всех видов краски.

Кроме того, следует отдавать предпочтение грунтовке и краске одного производителя, это будет гарантией совместимости составов. Так для акриловых красок компании SEMIN лучше всего применять грунт-краску

СУ-КУШ Грунт белый. Она создана на акриловой основе, имеет белый цвет и обеспечивает высокую адгезию.

Грунтовка под обои:

Для этой цели можно применять различные универсальные составы.

Основная цель грунтовки в данном случае снижение расхода клея, который сам по себе отличается высокими адгезивными качествами. Поэтому грунтовка применяется в большинстве случаев в качестве перестраховки. Такой же состав используется и перед укладкой плитки на стену.

Начинающим строителям можно дать следующий совет — не стоит гнаться за копеечной экономией и отказываться от грунтовки. Ее применение будет залогом качества и долговечности всех декоративных покрытий. 

Какие бывают грунтовки, для чего нужны и как их выбрать

Грунтовки: виды, способы применения, выбор лучших марок

19.08.2019

Грунтование является одним из обязательных подготовительных процессов перед проведением декоративно-отделочных работ. На рынке представлено много разновидностей грунтовок. Неправильный выбор состава может негативно сказаться на эксплуатационных качествах отделки. Поэтому важно понимать, какая грунтовка для чего может быть использована.

Все представленные грунты на рынке можно объединить в три основные категории, а именно:

Выбор производителя и марки грунта должен отталкиваться именно исходя из того, к какой категории относится состав. В данной публикации предлагаем ознакомиться с характеристиками, назначением, свойствами и способами применения разных видов грунтовок. Ведь, казалось бы, такой не очень существенный процесс, как грунтование, может повлиять на эксплуатационные свойства конкретного материала и качество ремонта в целом.

Грунтовка глубокого проникновения

Грунтовка глубокого проникновения представляет собой полимерно-водный раствор. Его основное назначение заключается в укреплении рыхлых (слабых), пористых, сильно впитывающих оснований для последующего проведения отделочных работ.

Принцип действия грунтовки глубокого проникновения достаточно простой. В состав этого готового для нанесения грунта входит акрил и стирол в разбавленном виде. При нанесении, вместе с водой в поверхностную структуру основания попадают и сами полимеры. После полного испарения воды из основания, внутри остается только сухое вещество. Во время высыхания акрил на молекулярном уровне связывается с материалом стен, полов или потолков. Таким образом обеспечивается обеспыливание, укрепление поверхностного слоя и выравнивание влаговпитывающей способности основания.

Для последующего проведения работ важно дождаться полного высыхания грунта. В ином случае полимер не сможет связаться с материалом и эффекта не будет. В зависимости от условия окружающей среды (температура и влажность), один слой высыхает на протяжение от 1-2 до 6 часов. Многие специалисты проводят отделку только лишь на следующий день после нанесения грунта.

Наносится грунтовка глубокого проникновения от 1 до 2 слоев. Не рекомендуется делать больше слоев, так как появляется риск «перегрунтовать» основание. Большое количество полимера в структуре может негативно сказаться на влагопоглощении, что приведет к снижению адгезии с штукатурными растворами и клеевыми материалами.

Какие бывают грунтовки глубокого проникновения?

Не все грунтовки глубокого проникновения обладают одинаковыми свойствами. Их особенности напрямую связаны с количеством сухого вещества в растворе. Это определяет назначение и способ использования подобного грунта.

• Грунтовка Юнис для внутренних работ. Продукт на основе акрилатных смол, который применяется для обработки оштукатуренных, шпаклеванных поверхностей, ячеистого бетона, бетона, гипсовых плит, как ГКЛ, ГВЛ, ПГП и прочих материалов со схожими свойствами. Грунт рекомендуется применять только внутри помещений с нормальным уровнем влажности. Используется для подготовки поверхностей перед оштукатуриванием или покраской.
• Грунтовка Ceresit CT 17 глубокого проникновения. Достоинством данного продукта является то, что помимо упрочения основания, он дополнительно выравнивает влаговпитываемость. Таким образом, данный грунт может быть использован для более широкого спектра последующих работ – покраска, поклейка обоев, плиточная кладка.
• Грунтовка Файдал Тифенгрунд морозостойкая. Применяется для обработки минеральных сильновпитывающих оснований, а также рыхлых (но прочно удерживающихся), мелящихся, пачкающихся поверхностей. Ее особенности заключаются в высоком процентном содержании сухого вещества (12%) и способности проникать на глубину до 10 см в структуру стены. За счет этого продукт обеспечивает дополнительную клеящую способность. Допускается применение данного состава для подготовки фасадов и внутренних помещений под цементные и штукатурные растворы.
• Грунтовка ЕК G100 концентрированная – это концентрат, который позволяет мастеру самостоятельно приготовить раствор исходя из состояния поверхности. Эта марка грунта отлично подойдет для тех, кто планирует масштабный ремонт в местах, где будут проводиться штукатурные, малярные, оклеечные работы, заливка полов и прочее.

Грунтовки универсальные

Универсальная грунтовка применяется с целью снижения и выравнивания влагопоглощения стен при проведении отделочных мероприятий. Зачастую, такие составы не обладают другими уникальными свойствами, хотя возможны и исключения. Примеры таких исключений приведем далее.

Универсальными этот вид грунтовок называется потому, что обрабатывать ими допускается поверхности для последующего проведения большинства видов работ. К таким относятся:

• монтаж плитки на клей;
• нанесение гипсовых или цементных штукатурок;
• подготовка поверхностей для стяжек и наливного пола;
• покраска любыми видами ЛКМ;
• поклейка обоев.

Универсальная грунтовка, обладая свойством выравнивания влаговпитываемости поверхности, обеспечивает полезные свойства, как:

• повышенное время работы с растворами при монтаже керамической плитки, штукатурок и шпаклевок на сильно впитывающие основания;
• снижение расхода краски при окрашивании поверхностей;
• не дает обойному клею быстро сохнуть на стене и повышает время для нанесения полотна.
• дополнительно такой грунт может укреплять поверхностный слой, обеспыливать основание, улучшая тем самым адгезию с растворами.

Универсальные грунтовки отлично подходят для работы с сильно впитывающими материалами. Они идеальны для обработки пенобетона, газосиликата и других ячеистых бетонов. На обработанную поверхность намного легче ложится штукатурка (особенно гипсовая). В ней происходит полная гидратация, что обеспечивает отсутствие образования трещин во время последующей эксплуатации.

Примером качественных универсальных грунтовок являются:

• Грунтовка ЕК G200 универсальная. Акриловая грунтовка, которая отлично выравнивает влаговпитываемость пористых материалов. Рекомендована для подготовки стен под тонкослойное оштукатуривание, поклейку обоев, а также подготовку стяжек под заливку самонивелирующимися смесями.
• Грунтовка Юнис универсальная. Состав для подготовки стен из ячеистого бетона и материалов на основе гипса под последующую кладку плитки или штукатурки на основе гипса, цемента. Особенность этой продукции в наличии в составе полимеров, которые повышают адгезию. Допускается использовать даже для грунтования деревянных поверхностей под покраску, в частности, плит ДСП, МДВ, ДВП и прочих.
• Грунтовка Кнауф Миттельгрунд F. Концентрированная универсальная грунтовка со специальным свойством – морозостойкость. Этот грунт допускается применять внутри помещений на промерзающих стенах. Идеально подходит для пено и газоблока, силикатного кирпича. Также может применяться для обработки листов на основе гипса, кирпича, по цементной стяжке перед нанесением наливного пола. Этот грунт допускается разбавлять в пропорции до 1 к 5, что обеспечивает оптимальный выход продукта. 

Бетоноконтакт: свойство грунта и его применение

Бетоноконтакт – это особый вид грунтовочных составов, который в последнее время приобрел широчайшее применение. Данный материал производится на основе дисперсии акрилатных смол с добавлением минеральной крошки. После нанесения на поверхность и высыхания, он образует своеобразную пленку. Поверхность этой пленки укрыта мелкими твердыми частичками, которые создают эффект шероховатости.

Обычно бетоноконтакт окрашивают в розовый цвет. Сделано это для того, чтобы легче визуально определять, загрунтован ли участок полностью или есть на нем пробелы. Наличие любых пробелов на обработанной поверхности может негативно сказаться на эффективности грунтовки.

Многие считают, что грунтовка бетоноконтакт универсальная и может использоваться на любых типах поверхностей и для любых последующих работ. Это утверждение является ошибочным. Главное назначение материала заключается в следующем:

Бетоноконтакт – грунтовка, которая предназначена исключительно для подготовки слабовпитывающих оснований для последующего нанесения штукатурки.

К числу слабовпитывающих оснований относится монолитный бетон, встречающийся в панельных домах. Также допускается наносить бетоноконтакт на старую краску, если удалить ее с поверхности любым способом невозможно. Эффективен будет этот грунт для обработки плит перекрытия с целью подготовки потолков под тонкослойное оштукатуривание.

На загрунтованную бетоноконтактом поверхность допускается наносить любые виды цементных или гипсовых штукатурок. Причем, наилучшим образом бетоноконтакт ведет себя именно с растворами на гипсовой основе. Причин этому, как минимум, есть две:

• снижение водопоглощения стен практически до нулевой отметки;
• придание обработанной поверхности шероховатости.

Гипсовые штукатурки быстро отдают влагу. При нанесении толстым слоем это свойство может привести к неравномерному водопоглощению по структуре штукатурки. Она начнет, банально, «сползать» со стен еще до полного сцепления с поверхностью. Водонепроницаемая пленка бетоноконтакт позволяет избежать образования такого эффекта. А дополнительные крупицы минеральной крошки на поверхности обеспечат дополнительное сцепление с гипсом.

Бетоноконтакт – это паропроницаемая грунтовка. Это также важный фактор при выборе материалов для отделки жилых помещений. За счет данного свойства грунт не будет препятствовать стенам «дышать». Он не будет первопричиной появлению под штукатуркой грибков и плесени.

Какую грунтовку бетоноконтакт покупать?

Хорошая грунтовка бетоноконтакт должна иметь надлежащее качество: иметь достаточное содержание полимеров в составе и четкую пропорцию минеральных наполнителей. Мы же рекомендуем использовать следующие виды бетоноконтакта:

• Грунтовка бетонконтакт Ceresit CT 19. Это высококачественный грунт с добавками кварцевого песка. Обеспечивает силу сцепления со слабовпитывающими основаниями до 1,5 МПа. Один из немногих грунтов, который рекомендован производителем под последующую укладку керамической плитки. Продукт является морозостойким, поэтому допускается его использование снаружи зданий на вертикальных поверхностях. Идеально подходит для последующего оштукатуривания цементными и гипсовыми штукатурками.
• Грунтовка ЕК Бетонконтакт – состав на основе акрилатной смолы. Легко наносится и быстро сохнет. Существенно повышает адгезию за счет свойств полимерной пленки и кварцевого песка в составе. Рекомендован для монтажа штукатурок и для плиточных работ.
• Грунтовка Кнауф Бетонконтакт. Акриловая дисперсия с керамическим песком, которая применяется для подготовки гипсовых материалов и ячеистых бетонов под последующее оштукатуривание гипсовыми штукатурками.

Когда лучше не использовать бетоноконтакт?

На практике грунт бетоноконтакт не зарекомендовал себя как идеальный материал для подготовки стен перед кладкой керамической плитки и, тем более, керамогранита. Причина заключается в том, что плиточный клей имеет более высокую адгезивную способность, чем грунт. Сила сцепления плиточных клеев составляет от 0,5 МПа, в то время как у бетоноконтакта она лишь 0,4 МПа (со слабовпитывающими, осыпающимися материалами). Это приводит к снижению прямого сцепления клея с основанием. Ввиду большого веса керамической плитки и керамогранита, они будут создавать увеличенные нагрузки на грунт. В итоге бетоноконтакт может либо расслоиться, либо «сойти» со стены вместе с плиткой.

Во избежание негативного результата для подготовки поверхностей под укладку плитки лучше использовать такие грунтовки как бетонконтакт Ceresit CT 19 или ЕК Бетонконтакт. Производители этих марок рекомендуют именно данные продукты для подготовки стен под плиточные работы.

Не рекомендуется использовать бетоноконтакт любого производителя на рыхлых поверхностях. С подобными основаниями грунт не способен обеспечить заявленную производителем адгезию. Сила сцепления слоя с такими минеральными материалами будет снижена. Учитывая, что адгезия штукатурных растворов составляет от 0,3МПа, эффекта от обработки поверхностей бетоноконтактом не будет.

Нельзя наносить бетоноконтакт на невпитывающие основания – металлические, деревянные или пластиковые поверхности. Слой не сможет нормально сцепиться с подобными основаниями. Даже если это произойдет, то учитывать нужно особое свойство бетоноконтакта – паропроницаемость. Скопление влаги между поверхностью и грунтовкой приведет к очень быстрому сползанию последней.

Резюме: какая грунтовка нужна

Выбор того или иного типа грунта должен основываться на двух факторах – тип основания и вид проводимой декоративной отделки. Наши рекомендации следующие:

1. Грунты глубокого проникновения будут эффективные только на стенах с «сыпящимся» и «мелящимся» эффектом. Их задача заключается в укреплении поверхностного слоя материала, связывания его структуры. Это позволяет увеличить надежность самого основания и повысить адгезию с растворами.
2. Грунты универсальные подойдут для проведения отделочных работ, где важно уменьшить влаговпитываемость поверхностей. К примеру, для обработки пено-, газобетона, силикатных блоков, при монтаже керамической плитки или поклейки обоев. Загрунтованная поверхность способствует гидратации штукатурки, дает больше времени на выравнивание плитки по уровню или состыковки полотен.
3. Грунты Бетоноконтакт лучше использовать при монтаже цементных и гипсовых штукатурок и только на слабовпитывающих основаниях. В другом случае существенного эффекта вы не добьетесь, а иногда даже можно усугубить ситуацию.

Грунты не являются панацеей, которая обязательно должна гарантировать великолепный результат. Грунты – это, прежде всего, вспомогательное средства, которые упрощают процесс монтажа и делают его более качественным и надежным. Главное, при этом, выбирать правильный и подходящий состав и в точности соблюдать технологию монтажа того или иного раствора, клея, краски.

Виды грунтовок | Строительный портал

Грунтовка – это специальный жидкий состав, который наносится на обрабатываемую поверхность перед покраской, шпаклёвкой и другими работами. Обычно в него входят плёнкообразующие вещества (масла, смолы, битумы, разные виды клея), пигменты, ускорители высыхания и другие добавки. Основа грунтовки может быть минеральной, акриловой, алкидной, масляной и т.д. Краска почти всегда лучше ложится на грунт, имеющий такую же основу.

Содержание

1. Зачем нужна грунтовка
2. Области применения грунтовок
3. Некоторые виды грунтовок

В недалёком прошлом для грунтования стен и потолков использовали обойный клей (если требовалась грунтовка под обои), разбавленный с водой клей ПВА или силикатный, сильно разведённую растворителем краску. Дерево обрабатывалось олифой. Сейчас на рынке лакокрасочных материалов можно купить как универсальные недорогие грунты, так и качественные узкоспециализированые составы известных производителей.    

Современная промышленность предлагает богатый ассортимент строительных грунтовочных составов: грунтовки глубокого проникновения, уменьшающие впитывающую способность поверхности, укрепляющие и улучшающие адгезию грунтовки, изолирующие, антикоррозийные, фунгицидные, антисептические и другие грунтовки.

Условно грунтовки разделяются на пропитки (используемые для первичной обработки основы) и на улучшающие адгезию составы. В продаже имеются готовые смеси и требующие разбавления соответствующими растворителями сухие основы для грунта.

Зачем нужна грунтовка

В первую очередь грунтование поверхности помогает наложить последующие слои более качественно. К тому же, такое покрытие гораздо дольше простоит. Некоторые виды грунтовочных составов могут регулировать пористость основы, укреплять её. Существуют смеси, препятствующие износу различных материалов и защищающие их от коррозии.

Кроме того, использование грунтовок под покраску значительно сократит расход  дорогой краски. Благодаря им краска ложится ровным слоем, сглаживаются мелкие дефекты.

Области применения грунтовок

Главным фактором, влияющим на выбор нужного вида грунтовки, является материал основы. Поэтому грунтовочные составы по области их применения условно можно разделить на следующие группы:

Грунтование минеральных поверхностей

К минеральным поверхностям относятся кирпич, шлакоблок, бетон, газобетон, штукатурка и так далее. То есть,  материалы, из которых в основном состоят стена и потолки зданий.  

Лидирующие позиции при подготовке «голых стен» к последующим покрытиям занимает грунтовка глубокого проникновения. Механизм действия которой заключается в максимально глубокой пропитке материала основы, при этом полимерная составляющая хорошо скрепляется с частицами основания, оставляя обрабатываемую поверхность пористой. Это значительно увеличивает адгезию следующего слоя с минеральным основанием. Часто грунтовки глубокого проникновения имеют фунгицидные (противогрибковые) добавки.

Если же поверхность чересчур рыхлая, пористая, не прочная, то потребуется укрепляющая грунтовка. Такая смесь имеет в своём составе больше клеящих веществ, то есть при проникновении в материал они заметно укрепляют его верхний слой. Заметим, что расход грунтовки зависит от пористости обрабатываемой поверхности.  Укрепляющие грунтовки часто применяют при работе на содержащей недостаточное количество цемента штукатурке в старых зданиях. Но не следует забывать, что такие смеси укрепляют материал только на глубину своего проникновения – осыпающуюся штукатурку они не спасут.

Универсальная, или грунтовка общего назначения, наносится между слоями покрытий. Она улучшает адгезию, позволяет ровно нанести краску и т.д. При её выборе следует учитывать не только материал основания, но и слой, наносимый следующим.

Противощелочная грунтовка требуется только при использовании органорастворимых красок для обработки содержащих щёлочь поверхностей. К ним могут относиться новый бетон, цементная стяжка или обработанная противопожарными средствами поверхность.

Грунтовка бетоноконтакт используется для обработки гладких твёрдых поверхностей, например, бетонных плит, гипсокартона или окрашенных масляной краской оснований. Эта смесь содержит песок и цементирующие добавки, что позволяет сделать поверхность более шероховатой. Таким образом, гладкая, с плохой адгезией поверхность становится пригодной к последующей штукатурке, шпаклёвке, поклейке кафеля и другим отделочным работам.

Обработка дерева

Обработка деревянных поверхностей и деталей производится в несколько этапов. В первую очередь дерево нужно оградить от биологических факторов, вызывающих разрушение. Это гниль, грибок, водоросли, насекомые, грызуны. Для защиты используются специальные пропитки, имеющие антисептические, фунгицидные, пестицидные, инсектицидные и другие составляющие. Для максимальной защиты  древесины требуется наносить эти пропитки несколько раз.

Другие грунтовки наносятся на дерево перед покраской (в некоторых случаях и заменяют её): они сглаживают или, наоборот, вспучивают структуру основы. При их использовании краска ложится намного ровнее, значительно уменьшается её расход благодаря меньшему впитыванию.

К специальным составам для грунтовки дерева можно отнести средства для обессмаливания поверхности древесины хвойных пород. Эти препараты делятся на растворяющие и омыляющие. После их применения может понадобиться механическая обработка деревянных поверхностей.

Грунтовки для металла

При обработке металлических поверхностей (чёрных металлов) с заметными следами коррозии, в первую очередь используют преобразователь ржавчины. После его использования проводят механическую обработку. И только потом можно грунтовать поверхность, даже если грунтовка содержит ортофосфорную кислоту (основной компонент преобразователя).

Антикоррозийные грунтовки под покраску для чёрных металлов и цветных используются разные (оцинкованное железо грунтуют составами для цветных металлов).

Грунтование других поверхностей

В некоторых случаях может понадобиться покраска материалов, на которые краска ложится плохо, а в некоторых случаях и разъедает их (кафель, стекло, керамика, пластмассы). Для таких ситуаций подойдут грунтовочные составы с повышенным сцеплением.

Есть грунтовки, блокирующие различные пятна (копоть, жир и т.д.). При использовании грунтов против пятен нежелательные пятна со временем не проступят сквозь краску или обои.  

Некоторые виды грунтовок

Эмульсионная или акриловая грунтовка подходит практически для всех видов поверхностей: кирпича, бетона, штукатурки, шпаклёвки, гипсокартона, дерева и т.д. Исключение составляют металлические поверхности – большинство таких грунтовок не содержат антикоррозийной составляющей. Среди достоинств грунтующих составов на акриловой основе лёгкость использования, возможность разбавления обычной водой. Быстрое высыхание (за 2-4 часа) и отсутствие сильного запаха делают акриловый грунт очень удобным при работе в жилых помещениях. На акриловой основе производятся как поверхностные, так и грунтовки глубокого проникновения.

Алкидная грунтовка широко используется для подготовки деревянных поверхностей под покраску, срок её высыхания колеблется от 10 до 16 часов. Этот грунтующий состав «разрыхляет» верхний слой древесины, что значительно улучшает адгезию между краской и деревом. Такой грунт на много увеличивает стойкость покрытия, увеличивает срок его службы. Используют алкидные грунтовки и для покрытия железа. Не предназначены для использования на минеральных поверхностях.

Эпоксидная и полиуретановая грунтовки по составу являются разбавленными растворителями соответствующими красками. В основном ими грунтуют бетонные основы, подготавливая их для нанесения эмалей.

Шеллаковая грунтовка используется для обработки сучьев на срезах древесины хвойных пород. Используется такой грунт и при работе с водорастворимыми морилками.

Полистирольные грунтовки используются на оштукатуренных и деревянных поверхностях. Но из-за высокой токсичности применять их можно только в хорошо проветриваемых нежилых помещениях или при наружных работах.

Специализированные грунтовки по металлу условно разделяются на изолирующие, протекторные и фосфатные. Изолирующие грунтовки имеют в своём составе цинковые белила и железный сурик. Такие грунтовки не взаимодействуют с металлом, а защищают его от проникновения влаги механически. К разряду изолирующих грунтовок относятся глифталевые и фенолоформальдегидные составы. Срок высыхания при комнатной температуре колеблется от нескольких часов до двух дней.

Пассивирующая или протекторная грунтовка, цена на которую значительно выше,  превосходит изолирующую по надёжности. Эта группа грунтов может применятся на чёрных и цветных металлах. Благодаря большому содержанию цинка (до 90%) такое покрытие может выдерживать эксплуатацию в некоторых агрессивных средах.

Фосфатные грунтовки улучшают адгезию краски к металлу, предотвращают образование ржавчины. Перед использованием такой грунт разводится кислотным разбавителем. Наносят его в несколько слоёв под стойкие эмали. Грунтовка, характеристика которой приведена выше, используется для обработки находящихся во влажной среде чёрных металлов.    

грунтовка глубокого проникновения, сцепляющая грунтовка, упрочняющая грунтовка, универсальные грунтовки. Водно-дисперсионная грунтовка, водоразбавляемая акриловая грунтовка, грунтование поверхности

Для того, чтобы выполнить качественную окраску строительных конструкций, прежде всего необходимо должным образом подготовить поверхность. Особая и ответственная роль при этом по праву принадлежит грунтовкам.

О грунтовании и грунтовках

Современной промышленностью выпускаются грунтовки самого различного назначения: грунтовки для укрепления старых оснований, грунтовки глубокого проникновения, грунтовки для улучшения адгезии (сцепляющие), изолирующие грунтовки, антикоррозийные грунтовки и т. д.

Грунтовки активно применяются как для фасадных работ, так и для внутренней отделки помещений, предопределяя качество финишного покрытия.
Поскольку при работе с самыми разнообразными поверхностями приходится подбирать индивидуальные решения к каждому конкретному случаю, необходимо определиться, как и когда следует применять необходимую грунтовку или грунтовочный состав.
Прежде всего это зависит от краски или эмали, с которой собираются работать.

Главный и самый очевидный совет в этом случае — следует подбирать и грунтовку, и краску на одной основе. Например, для акриловых водно-дисперсионных красок следует выбирать акриловые водорастворимые грунтовки.

Водно-дисперсионные грунтовки могут быть укрепляющие и глубокого проникновения. Отличаются они размером частиц используемого связующего — в грунтовках глубокого проникновения они в 8-10 раз мельче, чем в укрепляющих грунтовках, потому и легче проходят сквозь микропоры и капилляры материалов.

От этого зависит и взаимодействие с обрабатываемым материалом — укрепляющие грунтовки работают только с верхними слоями поверхности, в то время как глубоко проникающие грунтовки пропитывают основу на глубину до 5мм, «склеивая» ее по всему объему.

Фасадные грунтовки

Некоторые минеральные поверхности материалов, из которых сделан фасад, могут предопределить различные дефекты, проявляющиеся впоследствии на уже окрашенной поверхности. Чтобы этого не произошло, необходим правильный подбор грунтовочных составов.

Это могут быть как водоразбавляемые грунтовки, так и грунтовки на органических растворителях, которые во многих слу­чаях помогают решить проблему критических поверхностей (в том числе там, где рыхлый слой штукатурки или сильно впитыва­ющая поверхность). Водоразбавляемые грунтовки при высыхании не имеют запаха/

Фасад-Грунт — водный грунт для фасада из кирпича, бетона, гипса или пенобетона. В основе — акриловая смола. Грунтовка предшествует нанесению краски Фасад-Люкс и позволяет уменьшить ее расход, отличается высокой скоростью высыхания — 1 час

Проакрил-Грунт — водорастворимый грунт для фасадных работ на основе акриловой смолы. Состав хорошо проникает в поверхность, предотвращая ее растрескивание, пожаробезопасен, обладает отличными антисептическими свойствами.

Он снижает расход краски и продлевает срок службы поверхности. Его можно использовать не только для фасадных работ с пористыми поверхностями, но и для внутренних и во влажных помещениях. Покрытие высыхает за 1 час.

Грунтовки могут также подразделяться на пигментированные и прозрачные. Пигментированные грунтовки выполняют, кроме основной, еще несколько функций. Они обладают свойством вентилируемости и позволяют поверхности «дышать».

Даже при достаточной влажности такая грунтовка дает возможность влаге выходить в виде пара. Кроме этого такая грунтовка позволяет сформировать первичный цветовой слой для дальнейшего нанесения финишного покрытия.

Прозрачные грунтовки предназначены для укрепления поверхности. К ним, прежде всего, относятся эффективные водные грунтовки на акриловой основе, закрепляющие и выравнивающие поверхностный слой, что способствует получению равномерного основного покрытия.

Грунтовки на органических растворителях позволяют решить проблему образовавшихся высолов, связывая проступающие соли на покрытии фасада. Такие грунтовки хорошо применять на осыпающихся, рыхлых и мелящихся поверхностях.

Акриал-Грунт — укрепляющий грунт для фасада на акриловой основе, отличающийся хорошей устойчивостью к атмосферных воздействиям. После его применения основание становится более прочным и не осыпается.

Его используют как защиту как наружных и внутренних поверхностей. Материал подходит для всех видов минеральных и древесных оснований. Высыхает за 10 часов.

Проакрил Бетон-Контакт — акриловая грунтовка с кварцевым наполнителем. Используется для покрытия фасада, является хорошим антисептиком, пожаробезопасна.

Состав применяют для поверхностей, плохо впитывающих влагу или старых поверхностей, которые прочно держатся (например, старая керамическая плитка) для последующего нанесения штукатурки и других материалов, т.к. он значительно увеличивает адгезию. Полное высыхание происходит за 24 часа.

Грунтовки для внутренних работ

Грунтовки для внутренней отделки применяются, прежде всего, для стен, отделанных гипсокартонными листами. Это необходимо для того, чтобы связать все водорастворимые вещества, которые находятся внутри этих листов, и сократить до минимума впитывающую способность поверхности. Для этих целей лучше всего подойдет водоразбавляемый акриловый грунт.

Для закрепления и выравнивания стен и потолков, ранее оклеенных обоями, особенно эффективны грунтовки, содержащие органические растворители.

Люксорит-Грунт — пожаробезопасная и экологичная антисептическая грунтовка для внутренних работ. Глубоко проникает в поверхность, предохраняя ее от трещин и рассыпания. Состав не имеет запаха и быстро высыхает. Наличие специальных добавок в составе помогает защищать поверхность от плесени и грибка.

Люксорит Бетон-Контакт — грунтовка бетоноконтакт для помещений, применяется на поверхностях, невпитывающих влагу. Помогает увеличить сцепление последующих слоев штукатурки с основанием. Это водостойкое и экологичное покрытие является также прекрасным антисептиком. Кварцевый наполнитель создает фактурную поверхность, обеспечивая долговечность и устойчивость покрытия.

Люксорит-Шпатлёвка — готовая к нанесению финишная шпатлевка. Она легко наносится и не дает усадки при высыхании. Применяется для поверхности стен и потолков. С помощью этого материала можно ремонтировать поврежденную штукатурку, заделывать швы гипсокартонных листов. Для высыхания понадобится 12 часов, затем можно наносить краску или другие покрытия.

Универсальные грунтовки

Существует также большое разнообразие грунтовок и грунтовочных составов, предназначенных для грунтования различных строительных поверхностей. Сюда относятся все виды грунтовок для подготовки к окраске алюминиевых, медных, оцинкованных стальных поверхностей, грунтовок для подготовки деревянных фасадных поверхностей и т.д.

Такие грунтовки могут применяться для подготовки поверхности к окраске как для наружной отделки, так и для внутренних работ.

Строительные краски и грунтовки — на сайте krasko.ru.

Ассортимент строительных грунтовок чрезвычайно широк и разнообразен. Поэтому грунтовочные материалы следует применять в строгом соответствии с прилагаемыми техническими инструкциями и описаниями. Информацию о том, нуждается ли данная поверхность в грунтовании, вы сможете найти в информационных материалах или воспользоваться рекомендациями фирмы-поставщика и советами профессиональных строителей.

Важно помнить, что качественное грунтование — это залог качества окрашиваемой поверхности.

ДНК-праймеров — обзор

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

В технологии ПЦР специфические последовательности ДНК обнаруживаются и размножаются in vitro. Небольшие, но специфические праймеры ДНК добавляются к выделенной и денатурированной целевой ДНК образца. Если эти праймеры встречаются с комплементарной последовательностью оснований нуклеиновой кислоты, они гибридизуются. Впоследствии термостабильная ДНК-полимераза удлиняет праймеры в соответствии с комплементарной последовательностью оснований, заданной целевой ДНК. Этот циклический процесс обычно повторяется около 30 раз, амплифицируя ДНК-мишень в 10 ⁵ –10 ⁷ раз.

Грунтовки могут быть разного назначения. Конкретные праймеры нацелены на известный фактор вирулентности одного вида и позволяют одновременное обнаружение и идентификацию, тогда как несколько праймеров с более широким спектром подходят для нескольких видов. Теоретически несколько микроорганизмов в образце могут быть обнаружены одновременно с помощью так называемой мультиплексной ПЦР.

ПЦР — это чувствительный, специфический и быстрый метод обнаружения микробов (тестирование на присутствие / отсутствие), который обеспечивает качественные результаты.Теоретически отдельную молекулу целевой ДНК можно обнаружить в течение одного рабочего дня. Однако ПЦР может быть подавлена ​​или ее чувствительность сильно снижена при применении к образцам пищевых продуктов (см. Таблицу 2). Большое количество жиров и белков в сложных пищевых продуктах, а также некоторые компоненты селективных питательных сред подавляют реакцию ферментативной амплификации ДНК. Кроме того, небольшие объемы реакции ПЦР обычно не могут быть приспособлены к образцам большого размера, что обусловлено низким уровнем загрязнения (например, 25 г продукта для тестирования наличия / отсутствия Salmonella ).

Другая проблема, связанная с другими быстрыми методами, заключается в том, что технология ПЦР не может отличить генетический материал от мертвых и живых клеток. Поэтому была разработана модификация ПЦР на основе мРНК (NASBA, амплификация на основе последовательности нуклеиновой кислоты), которая является показательной для живых клеток в образце.

Регулярное применение технологии ПЦР в пищевой микробиологии обычно требует специальной предварительной обработки образцов (например, очистки, концентрации клеток, культивирования или селективного обогащения, иммуномагнитного разделения), адаптированной к каждой конкретной матрице образца.

Петлевая изотермическая амплификация (LAMP) — обзор и классификация методов последовательноспецифического обнаружения

В течение последних 20 лет изотермические тесты амплификации нуклеиновых кислот превратились в важный диагностический инструмент не только для клинического применения, но и для контроля качества пищевых продуктов и мониторинга окружающей среды. Петлевая изотермическая амплификация (LAMP) хорошо известна своей надежной, высокочувствительной и специфической амплификацией целевой ДНК, которая достигается за счет использования до шести праймеров.Кроме того, LAMP отличается своими изотермическими и энергоэффективными требованиями к усилению, что делает ее лучшим кандидатом для недорогой диагностики и анализа в момент необходимости. В последнее время методы обнаружения, специфичные для последовательности, приобрели большее значение, поскольку, в отличие от методов обнаружения, не зависящих от последовательности, они обладают высокой специфичностью по отношению к целевой ДНК. За последние 13 лет появилось множество методов, ориентированных на конкретные последовательности, основанных на очень разнообразном диапазоне методов зондирования, включая оптическое, магнитное, пьезоэлектрическое, электрохимическое и магниторезистивное зондирование.Чтобы дать структуру разнообразному множеству методов, специфичных для последовательности, мы создали систематическую классификацию и предоставили критическую сравнительную оценку в соответствии с каталогом критериев (аналитические характеристики, мультиплексирование, количественная оценка и инструментальные требования). Обнаружение на основе флуоресценции, составляющее половину методов, может обрабатываться на открытых платформах и удовлетворяет всем критериям, перечисленным ранее. Аппаратные требования обсуждаются с точки зрения сложности, портативности и жидкостных картриджей.Кроме того, оценивается уровень технологической готовности и тип платформы (открытая по сравнению с , адаптированная к методам), причем последняя играет важную роль в миниатюризации и автоматизации этапов рабочего процесса. Мы также наблюдаем рост использования датчиков, встроенных в смартфон, для улучшения тестирования точки необходимости на основе LAMP. Таким образом, последние разработки в методах последовательного обнаружения LAMP демонстрируют высокий потенциал для многих будущих приложений.

приложений ПЦР — семь основных категорий | Thermo Fisher Scientific

ПЦР имеет широкий спектр применения не только в фундаментальных исследованиях, но и в области медицинской диагностики, судебной медицины и сельского хозяйства.Как описано на этой странице, некоторые примеры приложений ПЦР включают:

Типы и приложения ПЦР-реакций

Протоколы для ПЦР могут различаться в зависимости от приложений.В этом видеоролике представлен обзор рутинной ПЦР, ПЦР с горячим стартом, ПЦР с высокой точностью, ПЦР с высоким содержанием ГХ и длительной ПЦР.

Экспрессия гена

Вариации в экспрессии генов среди типов клеток, тканей и организмов в определенный момент времени обычно исследуются с помощью ПЦР.В этом процессе РНК выделяется из представляющих интерес образцов, а информационная РНК (мРНК) подвергается обратной транскрипции в комплементарную ДНК (кДНК). Затем исходные уровни мРНК можно определить по количеству кДНК, амплифицированных в ПЦР. Этот процесс также известен как ПЦР с обратной транскрипцией , или RT-PCR ( Рисунок 1, ).

Рисунок 1.ОТ-ПЦР. РНК подвергается обратной транскрипции в кДНК, которая, в свою очередь, амплифицируется с помощью ПЦР (RT = обратная транскрипция, RTase = обратная транскриптаза).

Конечная ПЦР может быть проведена для количественной оценки экспрессии РНК по интенсивности амплифицированных продуктов в геле, хотя это полуколичественный подход.Например, вводимая кДНК последовательно разбавляется, а затем амплифицируется. Конечные выходы различных входных данных визуализируются на геле (, рис. 2, ), а затем интенсивности полос количественно оцениваются и нормализуются по отношению к эталонным генам домашнего хозяйства для оценки относительного уровня экспрессии амплифицированной мишени [1,2] . Сегодня ПЦР в реальном времени или qPCR в основном заменила ПЦР по конечным точкам для получения более надежных и количественных результатов экспрессии генов (подробнее о количественной ПЦР и обратной транскрипции).

Рисунок 2.Выходы ПЦР, полученные из серийных разведений исходной кДНК, визуализированные окрашиванием продуктов ПЦР на агарозном геле.

Генотипирование

ПЦР

может использоваться для обнаружения вариаций последовательности аллелей в конкретных клетках или организмах.Примером может служить генотипирование трансгенных организмов, таких как нокаутные и нокаутные мыши [3]. Наборы праймеров предназначены для фланкирования представляющих интерес областей и оценки генетических вариаций на основе присутствия или отсутствия ампликона и / или его длины (, рисунок 3, ). (Примечание по приложению: генотипирование мышей, обзорная статья: советы pcr по генотипированию мышей)

Рисунок 3.ПЦР для аллельного генотипирования трансгенных организмов. (A) Последовательности дикого типа или трансгенные последовательности в геномном локусе могут быть обнаружены путем конструирования праймеров ПЦР, специфичных для интересующих областей. (B) Продукты ПЦР можно использовать для определения генотипов, как показано на этой картинке геля. В этих экспериментах использовалась геномная ДНК мышей дикого типа (+ / +) и трансгенных (+/– и — / -) мышей.

Шесть советов ПЦР для быстрого генотипирования мышей

Вы тратите слишком много времени на генотипирование трансгенных мышей с помощью ПЦР? Посмотрите это видео с шестью советами по ПЦР, которые помогут вам завершить работу всего за час.

Однако для обнаружения специфических нуклеотидных мутаций амплифицированные последовательности должны быть дополнительно проанализированы. Например, секвенирование ампликонов ПЦР — один из подходов к изучению однонуклеотидных вариаций (SNV) и однонуклеотидных полиморфизмов (SNP).Настоятельно рекомендуется использовать ДНК-полимеразы высокой точности для предотвращения появления нежелательных мутаций во время ПЦР.

Генотипирование с помощью ПЦР также является фундаментальным аспектом генетического анализа мутаций рака и наследственности.

Клонирование

ПЦР широко используется для клонирования представляющих интерес фрагментов ДНК в методике, известной как клонирование ПЦР.В прямого клонирования ПЦР желаемый участок источника ДНК (например, гДНК, кДНК, плазмидная ДНК) амплифицируется и вставляется в специально разработанные совместимые векторы. Альтернативно, праймеры могут быть сконструированы с дополнительными нуклеотидами на их 5′-конце для дальнейших манипуляций перед вставкой. Примеры этих дополнительных последовательностей включают сайты рестрикции для клонирования посредством рестрикционного переваривания и лигирования, вектор-совместимые последовательности для лигирования-независимого клонирования и рекомбинационные последовательности для мультифрагментной сборки ( фиг. 4). (подробнее см. Веб-семинар по клонированию ПЦР)

Рисунок 4. Клонирование ПЦР: вставки, полученные с помощью ПЦР, клонированы в совместимые векторы. ( A ) Методы прямого клонирования ПЦР включают ТА и клонирование с тупым концом. ( B ) При непрямом клонировании ПЦР ампликоны модифицируют, например, путем рестрикционного переваривания, перед вставкой в ​​совместимые векторы.

Поскольку праймеры синтезируются в направлении от 3 ‘до 5’, неудачный или неполный синтез этих олигонуклеотидов ДНК будет иметь усеченные 5 ‘последовательности.Поэтому рекомендуется очистка для удаления не только избыточных реагентов из синтеза, но и неполноразмерных олигонуклеотидов ДНК, чтобы гарантировать успешное клонирование желаемого фрагмента ПЦР.

В дополнение к подготовке вставки, ПЦР является полезным методом после клонирования для скрининга того, несут ли колонии желаемую вставку. Праймеры могут быть разработаны для определения присутствия вставки, а также ориентации в векторе (узнайте больше о скрининге колоний с помощью ПЦР).

Мутагенез

Одним из преимуществ клонирования с помощью ПЦР является способность вводить желаемые мутации в интересующий ген посредством клонирования для исследований мутагенеза.В сайт-направленный мутагенез праймеры ПЦР конструируются для включения замен оснований, делеций или вставок в определенной последовательности. На схемах, показанных на фиг. 5 , праймеры направлены на последовательность, которая уже была клонирована в плазмиде. Продукт ПЦР, содержащий введенную мутацию, затем самолигируется для регенерации кольцевой плазмиды и используется для трансформации компетентных клеток (примечание к приложению: сайт-направленный мутагенез).

Рисунок 5.ПЦР в сайт-направленном мутагенезе. В этом подходе используются неперекрывающиеся праймеры (красная звездочка = мутантный нуклеотид, серая линия = удаленная последовательность, синяя линия = вставленная последовательность). Также могут быть рассмотрены альтернативные конструкции праймеров, например с 5′-перекрывающимися последовательностями [4-6].

Важные соображения для экспериментов по сайт-направленному мутагенезу включают:

1. Праймер дизайн
2. Выбор ДНК-полимеразы
3. Параметры ПЦР

Дизайн праймера: При разработке мутагенных праймеров желательно размещать мутированную последовательность ближе к середине праймера или по крайней мере на расстоянии 7-8 нуклеотидов от 3′-конца.Это обеспечивает эффективное 3′-удлинение и предотвращает репарацию оснований ошибочного спаривания (3 ‘→ 5’-экзонуклеазная активность) ДНК-полимеразой. Очистка праймеров ПЦР рекомендуется для максимального повышения эффективности мутагенеза и клонирования (подробнее: технические ресурсы Oligo).

Выбор ДНК-полимеразы: Использование ДНК-полимеразы высокой точности имеет решающее значение для создания фрагментов ПЦР с желаемой мутацией без внесения непреднамеренных ошибок. Кроме того, выбранная ДНК-полимераза должна быть способна амплифицировать всю длину матричной ДНК (например,g., чтобы получить полноразмерную мутантную плазмиду).

Параметры ПЦР: Частота ошибок ПЦР ниже при более коротких мишенях ПЦР и меньшем количестве циклов ПЦР. Чтобы сохранить точность последовательности при амплификации более длинной ДНК и / или для получения высоких выходов за счет меньшего количества циклов ПЦР, рекомендуется ДНК-полимераза с чрезвычайно высокой точностью воспроизведения и высокой процессивностью (узнайте больше о характеристиках ДНК-полимеразы).

Для введения множественных сайтов мутаций могут быть разработаны мутагенные праймеры с перекрывающимися гомологичными последовательностями для ПЦР.Гомологичные концы ампликонов затем направленно рекомбинируют, в результате чего получается плазмида с желаемыми множественными мутациями (, фиг. 6, ). Этому подходу можно следовать не только для создания мутаций в плазмиде, которая слишком длинная для амплификации с помощью одной ПЦР, но и для того, чтобы избежать более высокой частоты ошибок при длительной амплификации ПЦР (узнайте больше о длинной ПЦР).

Рисунок 6.Сайт-направленный мутагенез с использованием праймеров ПЦР с мутантными последовательностями и гомологичными концевыми последовательностями. Подход, показанный здесь, описывает механизм наборов для сайт-направленного мутагенеза Invitrogen GeneArt, где квадратные блоки представляют сайты рекомбинации и мутагенные сайты.

Метилирование

ПЦР можно использовать для исследования локус-специфичного метилирования.В методе, называемом специфическая к метилированию ПЦР (MSP) , две пары праймеров предназначены для дифференциации состояния метилирования интересующего локуса [7,8].

В MSP образцы ДНК сначала обрабатывают бисульфитом для преобразования неметилированного цитозина (C) в урацил (U). Обработка бисульфитом не влияет на метилированный цитозин ( ^m5 C). Для обнаружения метилированных сайтов конструируют одну пару праймеров с гуанином (G) для спаривания с ^m5 C в целевой последовательности; для обнаружения неметилированных сайтов конструируется другая пара праймеров с аденином (A) для спаривания с U в молекулах, преобразованных бисульфитом (а затем спаривается с тимином (T) в последующих циклах ПЦР).Положительная амплификация ПЦР в результате связывания праймера используется для определения состояния метилирования локуса (, фиг. 7, ). (Также узнайте об анализе метилирования рестрикционными ферментами.)

Рисунок 7.ПЦР, специфичная для метилирования. На первом этапе образцы ДНК обрабатывают бисульфитом для преобразования неметилированного цитозина в урацил. Два набора праймеров для ПЦР (метилирование и неметилирование) разработаны для дифференциации состояния метилирования локуса на основе амплификации обработанной бисульфитом ДНК. Неметилированная ДНК присутствует в виде одиночных цепей после обработки бисульфитом из-за несоответствий G-U, и для упрощения здесь показана только одна цепь ДНК.

Поскольку MSP в значительной степени зависит от специфичности праймера по отношению к последовательности, преобразованной в бисульфит, дизайн праймера играет решающую роль в успехе эксперимента.Во-первых, сайты связывания праймера должны содержать чувствительные к метилированию остатки, чтобы можно было обнаружить метилированные или неметилированные последовательности. Во-вторых, неметилированные праймеры обычно богаты АТ и, следовательно, должны быть длинными (например,> 30 нуклеотидов) с T _m ≥60 ° C, чтобы обеспечить специфический отжиг. Кроме того, последовательности с высоким AT часто способствуют образованию димера праймера, гибридизации с ошибочным спариванием, проскальзыванию ДНК-полимеразы и смещению амплификации. Следовательно, выбранная ДНК-полимераза должна иметь возможность амплифицировать матрицы с широким диапазоном содержания AT / GC.В-третьих, специфичность праймера должна быть эмпирически проверена с контрольными ДНК с известными и неизвестными состояниями метилирования для оценки ложноположительных результатов. Чтобы помочь различить состояния метилирования по несовпадениям пар оснований, рекомендуется конструировать праймеры для метилирования и неметилирования с парой G-A или T-C на их 3′-концах ( Рисунок 7, ).

Помимо амплификации последовательностей, богатых AT, ДНК-полимераза должна быть способна считывать остатки U в ДНК после обработки бисульфитом. Большинство высокоточных ДНК-полимераз не подходят для MSP (если они специально не модифицированы) из-за наличия урацил-связывающего кармана из их архейского происхождения.Точно так же присутствие U в матричной последовательности не позволяет обрабатывать UDG для предотвращения заражения переносом ПЦР.

Вместо конечной ПЦР можно использовать ПЦР в реальном времени с MSP для более количественного анализа метилирования. С помощью ПЦР в реальном времени анализ кривой плавления ампликонов ПЦР является альтернативным основанным на ПЦР подходом для определения состояния метилирования интересующего локуса.

Последовательность действий

ПЦР — это относительно простой подход к обогащению матричной ДНК для секвенирования.Для подготовки матриц секвенирования настоятельно рекомендуется использовать ПЦР с высокой точностью, чтобы сохранить точность последовательности ДНК.

При секвенировании по Сэнгеру фрагменты, амплифицированные с помощью ПЦР, очищаются и подвергаются реакциям секвенирования. Праймеры для ПЦР могут быть помечены на своих 5′-концах обычно используемым сайтом связывания для праймеров секвенирования (например, сайтом связывания «универсального праймера» M13 или T7) для упрощения рабочего процесса секвенирования (, фиг. 8, ).

Рисунок 8.Подготовка ампликонов ПЦР для секвенирования по Сэнгеру. Праймеры для ПЦР могут быть помечены общими сайтами праймеров для секвенирования для облегчения рабочего процесса.

В секвенировании следующего поколения (NGS) ПЦР широко используется для создания библиотек секвенирования ДНК. При подготовке библиотеки NGS образцы ДНК обогащаются с помощью ПЦР (когда начальное количество ограничено) и маркируются адаптерами секвенирования (вместе с уникальными штрих-кодами или индексами для мультиплексирования) ( Рисунок 9 ).В дополнение к высокой точности используемые ДНК-полимеразы должны демонстрировать минимальное смещение при амплификации, чтобы обеспечить репрезентативный охват библиотек секвенирования.

Рисунок 9.ПЦР при подготовке образцов ДНК для секвенирования следующего поколения.

Медицинские, судебно-медицинские и прикладные науки

Помимо фундаментальных исследований, технологии на основе ПЦР ежедневно используются в клинической диагностике, судебно-медицинских исследованиях и сельскохозяйственных биотехнологиях.Эти приложения требуют надежной работы, превосходной чувствительности и строгих технических характеристик. Таким образом, термоциклеры и реагенты должны соответствовать требованиям и специально разработаны для этих целей. Примеры молекулярной диагностики включают генетическое тестирование, обнаружение онкогенных мутаций и тестирование на инфекционные заболевания. В судебной медицине идентификация человека с помощью ПЦР основана на амплификации уникальных коротких тандемных повторов (STR) на гДНК для дифференциации людей. В сельском хозяйстве ПЦР играет важную роль в обнаружении пищевых патогенов, генотипировании растений для селекции и тестировании на ГМО.

В заключение, с момента своего появления в 1980-х годах ПЦР продолжает оставаться полезным инструментом с широким применением в биологии открытий, медицинской диагностике, судебной медицине и сельском хозяйстве.

1. Raeymaekers L (1999) Общие принципы количественной ПЦР. В: Kochanowski B, Reischl U (редакторы), Quantitative PCR Protocols .Тотова, Нью-Джерси: Humana Press. С. 31–41.
2. Siebert PD (1999) Количественная ОТ-ПЦР. В: Kochanowski B, Reischl U (редакторы), Quantitative PCR Protocols . Тотова, Нью-Джерси: Humana Press. С. 61–85.
3. Nobel Media AB (2014) Нобелевская премия по физиологии и медицине 2007 года — расширенная информация . nobelprize.org
   
4. Zheng L, Baumann U, Reymond JL (2004) Эффективный одностадийный сайт-направленный и сайт-насыщенный протокол мутагенеза. Nucleic Acids Res 32 (14): e115.
5. Liu H, Naismith JH (2008) Эффективный протокол одноэтапной сайт-направленной делеции, вставки, одно- и многосайтового мутагенеза плазмиды. BMC Biotechnol 8:91.
6. Xia Y, Chu W, Qi Q et al. (2015) Новое понимание процесса QuikChange ™ помогает использовать ДНК-полимеразу Phusion для сайт-направленного мутагенеза. Nucleic Acids Res 43 (2): e12.
7. Herman JG, Graff JR, Myöhänen S, Nelkin BD, Baylin SB (1996) ПЦР, специфичная для метилирования: новый анализ ПЦР для определения статуса метилирования CpG-островков. Proc Natl Acad Sci U S A 93 (18): 9821–9826.
8. Huang Z, Bassil CF, Murphy SK (2013) ПЦР, специфичная для метилирования. Методы Мол Биол 1049: 75–82.

Как создавать грунтовки | Бенчлинг

Дизайн праймеров с использованием инструментов молекулярной биологии Benchling

Дизайн праймера

может показаться простым; в конце концов, праймеры имеют длину менее 30 пар оснований! Но с учетом такого количества чувствительных характеристик праймеров, которые необходимо учитывать, а также огромного количества праймеров, которые может потребоваться создать исследователю, может быть сложно поддерживать процесс организованным и отслеживаемым.

Приложение

Benchling’s Molecular Biology позволяет создавать интеллектуальные праймеры вручную или автоматически с помощью мастера. С помощью интеллектуальных систем разрешений вы можете указать, какие команды имеют доступ к каким проектам. Затем команды могут сохранять учебники в пользовательских или общих библиотеках для дальнейшего использования или дальнейшего сотрудничества и разработки. В инструменте праймеров Benchling сканирует и обнаруживает сайты связывания в последовательностях, что позволяет точно прикреплять праймеры, запускать in silico PCR и использовать продукты PCR для планирования критических задач, таких как методы расщепления и лигирования, клонирование Гибсона и сборка Golden Gate.

Приложение представляет собой мощный инструмент, который используется не только для разработки праймеров. С более чем 10 инструментами на одной унифицированной платформе вы также можете создавать аннотации последовательностей, выполнять выравнивание и разрабатывать направляющие РНК (gRNA) CRISPR. Вы также можете легко обмениваться проектами и сохранять их, поскольку инструмент интегрирован с облачным блокнотом и реестром Benchling.

Грунтовки Design с Benchling

С помощью Benchling вы можете легко разрабатывать и анализировать праймеры в режиме онлайн.Дизайн праймеров для КПЦР, ПЦР, клонирования и секвенирования. Некоторые основные моменты включают:

• Быстро визуализируйте сайты связывания праймеров на интересующей последовательности и отслеживайте последовательности, для которых используются праймеры.
• Легко прикрепите один праймер к последовательности или соедините их попарно. Файлы последовательностей праймеров, которые в Benchling называются «олигонуклеотидами», содержат список всех последовательностей, к которым они когда-либо были присоединены, что обеспечивает полную прослеживаемость вашей библиотеки праймеров.

В Benchling можно создавать праймеры вручную или с помощью мастера праймеров.Если ваш праймер уже разработан, вы также можете легко найти любые существующие праймеры для присоединения к вашей последовательности или импортировать олигонуклеотиды в Benchling. Давайте посмотрим, на что способен инструмент Benchling для создания учебников.

Рисунок 6. Расчет праймера в Benchling

Ручной дизайн грунтовки

Вы можете создать праймеры вручную на платформе Benchling из последовательностей, которые уже используются в вашей организации. Чтобы создать праймеры вручную, выделите область матричной ДНК на карте последовательностей, выбрав нужный диапазон, щелкнув правой кнопкой мыши и выбрав создание прямого или обратного праймера.

Рисунок 7а. Ручное создание праймеров в Benchling

Затем на вкладке «Дизайн» вы можете сосредоточиться на основаниях выбранной последовательности, обозначить выступ и включить сайты разреза рестрикционным ферментом.

Рисунок 7b. Ручное создание праймеров в Benchling

После проектирования быстро проверьте праймеры автоматически на вкладке «Проверка». В интерфейсе доступно следующее:

• Значения свободной энергии Гиббса для гомодимера и мономеров
• Температуры плавления и содержание ГХ
• Диаграммы вторичной структуры димеров

Вы даже можете настроить термодинамические параметры, чтобы изменить способ вычисления температуры плавления, щелкнув значок гаечного ключа.После завершения проектирования присвойте праймеру имя и сохраните его в библиотеке праймеров.

Рисунок 7c. Ручное создание праймеров в Benchling

Wizard Primer Design

Вы также можете создавать праймеры с помощью мастера праймеров, который автоматически создает праймеры для вашей целевой последовательности с помощью технологии Primer3. Benchling поддерживает разработку трех основных типов праймеров: ПЦР, количественная ПЦР и праймеры для секвенирования. На каждом шаге мастера настройте необходимые параметры. Отрегулируйте содержание ГХ, температуру плавления, длину, зажим ГХ, длину ампликона и другие параметры.

Простой поиск, импорт и прикрепление существующих праймеров

Если ваш праймер уже разработан, с помощью Benchling вы также можете быстро искать, импортировать и прикреплять любые существующие праймеры.

Найдите существующие праймеры, которые связываются с вашей последовательностью, на основе определенных параметров праймера, таких как длина, температура плавления и количество допустимых несовпадений, и Benchling покажет их сохраненные местоположения. Выберите нужные праймеры и просмотрите их привязанными к карте последовательностей.

В качестве альтернативы можно импортировать праймеры с помощью функции Import Oligios в Benchling и быстро добавить любые из уже существующих праймеров в вашей организации.

Рисунок 8. Расчет праймера в Benchling с мастером

Это особенно полезно, если вы переносите какие-либо праймеры в Benchling из другого инструмента, такого как Vector NTI, Snapgene или Geneious. Тестирование поддерживает различные типы файлов последовательностей и переносит любые аннотации и теги, связанные с последовательностями.

Наконец, после создания или сохранения вы можете присоединить праймеры к выбранной последовательности. Все сохраненные праймеры перечислены в меню инструмента праймеров для любого файла последовательности, с которым вы работаете.

Присоединение существующих праймеров в Benchling позволяет автоматически находить существующие праймеры, которые связываются с вашей последовательностью, быстро визуализировать сайты связывания праймеров и просматривать все файлы последовательностей, к которым был присоединен любой олигофайл (праймер).

Отправьте праймеры в NCBI Blast

С помощью Benchling пользователь может легко проверить специфичность праймеров, отправив олигонуклеотиды через инструмент праймеров NCBI Blast. Оказавшись внутри Benchling, просто щелкните и перетащите карту последовательностей, чтобы выделить праймер (или любую другую интересующую последовательность), щелкните правой кнопкой мыши и отправьте в NCBI Blast.Последовательность отправляется в программу BLASTN, которая выполняет поиск нуклеотидов.

Рис. 9. Инструмент для струйной очистки NCBI Primer в Benchling

NCBI предоставляет инструмент NCBI Primer Blast для создания праймеров, но он требует, чтобы вы каждый раз вводили или копировали / вставляли олиго-последовательность для создания праймера. И после создания вы должны постоянно импортировать разработанный праймер в Benchling или в свой инструмент молекулярной биологии. Простое использование Benchling предоставит вам одно центральное место для всего рабочего процесса, в то же время позволяя легко отправлять свои олиго в инструмент для праймеров NCBI.

Создание пользовательских библиотек праймеров

Делитесь пользовательскими библиотеками праймеров со своими коллегами, чтобы вам никогда не приходилось задаваться вопросом, какие праймеры уже были разработаны и использовались в прошлом. Проекты основаны на определенных разрешениях, что позволяет командам настраивать собственные библиотеки по мере необходимости. Возможность записывать и публиковать праймеры — лишь одна из причин, почему Eligo Bioscience любит Benchling.

In silico PCR в Benchling

С помощью Benchling пользователь может легко проверить специфичность праймеров, отправив олигонуклеотиды через него. После разработки праймеров вы можете запустить ПЦР in silico с помощью Benchling.Просто выберите прямой и обратный праймеры, свяжите их в пару и создайте продукты ПЦР двумя щелчками мыши.

Рисунок 10. Выполнение ПЦР in silico в Benchling

После разработки функциональных праймеров и амплификации продуктов ПЦР (ампликонов) платформа Benchling может продолжить моделирование последующих процедур, таких как расщепление и лигирование, конструирование плазмид, трансфекция и методы клонирования, такие как сборка Гибсона и Голден Гейт.

Пользователь может «@» упомянуть любой из продуктов ПЦР, дайджестов, плазмид или файлов праймеров непосредственно в записи Notebook и автоматически зарегистрировать их в Benchling Registry.Свяжите любую из этих процедур in silico с реальным образцом, используемым в лаборатории, с помощью Benchling Inventory. Связывая эти проекты с физическими продуктами в лаборатории, Benchling предоставляет вам центральное место для доступа ко всем экспериментальным данным и обмена ими с разными учеными и группами.

Бесплатные инструменты для создания учебников для начинающих

Benchling for Academics предлагает Benchling Molecular Biology — включая инструменты для разработки учебников, дизайн CRISPR gRNA, выравнивания и многое другое — и Benchling Notebook бесплатно для студентов, аспирантов, аспирантов и любых других ученых.

С более чем 180 000 ученых, использующих Benchling по всему миру, мы инвестируем в формирование следующего поколения биологов. Доступ к бесплатным, современным и удобным инструментам позволяет академическому сообществу быстрее делать новаторские открытия и тратить меньше времени на записи в бумажных блокнотах, поиск данных с помощью отключенных инструментов и выполнение ручного ввода данных, подверженного ошибкам. Вот несколько полезных советов для ученых от пользователей Benchling for Academics о том, как они используют этот инструмент для повышения эффективности своих исследований.

Benchling for Academics также полезен профессорам и учителям естественных наук. Теперь инструкторы могут столкнуться с дополнительной проблемой преподавания курсов удаленно из-за пандемии коронавируса. Без доступа к курсам влажных лабораторий студентам может быть сложно понять концепции, лежащие в основе методов молекулярной биологии. Но при правильном подходе профессора и преподаватели могут использовать Benchling для адаптации лабораторных курсов для виртуального обучения.

Запросить демоверсию Benchling

Если вы хотите узнать больше о том, что Benchling может предложить вашим научным коллективам, запросите демонстрацию на Benchling.com / request-demo.

Дизайн грунтовки

— это только начало того, что Benchling предлагает своим клиентам. Benchling — это полностью интегрированная платформа исследований и разработок в области наук о жизни, которая поддерживает продуктивность ученых, отслеживание образцов, управление процессами и аналитику. Benchling является лидером в области облачной информатики для исследований и разработок в области наук о жизни, которую используют более 270 000 ученых по всему миру из транснациональных фармацевтических корпораций, ведущих биотехнологических компаний и крупных исследовательских институтов.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР): этапы, типы и применения

Этапы полимеразной цепной реакции (ПЦР)

Последнее обновление: 20 апреля 2020 г.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это эффективный и экономичный молекулярный инструмент для копирования или амплификации небольших сегментов ДНК или РНК.7 за относительно короткий период.

Этот метод амплификации in vitro позволяет амплифицировать одну копию нуклеиновой кислоты-мишени с использованием двух синтетических олигонуклеотидных «праймеров», которые связываются с целевой геномной последовательностью, которые удлиняются полимеразой Taq (термостабильная ДНК-полимераза). Автоматизированный процесс повторяющихся циклов (обычно от 25 до 40) денатурации матричной ДНК (при 94 ° C), отжига праймеров до их комплементарных последовательностей (50 ° C) и удлинения праймера (70 ° C) используется для амплификация целевой последовательности.

ПЦР был первоначально разработан в 1983 году американским биохимиком и лауреатом Нобелевской премии Кэри Маллис.

Праймер: Короткий сегмент нуклеотидов, комплементарный участку ДНК или РНК, который должен быть амплифицирован в ПЦР. В ПЦР используются две короткие последовательности ДНК, предназначенные для связывания с началом (прямой праймер) и концом (обратный праймер) целевой последовательности.

Taq-полимераза: Термостойкая ДНК-полимераза, первоначально выделенная из термофильной бактерии Thermus aquaticus , которая сопротивляется инактивации при температурах денатурации и позволяет удлинить праймер при высокой температуре.

Компоненты полимеразной цепной реакции (ПЦР)

Я был слишком взволнован, когда наша лаборатория впервые получила ПЦР в реальном времени (фото из файла).

• ДНК-матрица (образец ДНК, содержащий целевую последовательность для амплификации)
• Дезоксирибонуклеозидтрифосфаты (дНТФ)
• Буфер для ПЦР
• Праймеры (прямые и обратные)
• Полимераза Taq

Этапы p олимеразная цепная реакция-ПЦР

Для проведения ПЦР экстрагированный образец (содержащий матрицу целевой ДНК) добавляется в пробирку, содержащую праймеры, свободные нуклеотиды (dNTP) и полимеразу Taq.Смесь для ПЦР помещают в аппарат для ПЦР. Аппарат ПЦР увеличивает и понижает температуру смеси ПЦР в автоматических, запрограммированных этапах, которые генерируют копии целевой последовательности в геометрической прогрессии.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) состоит из трех основных стадий.

Этапы полимеразных цепных реакций (ПЦР)

1. Денатурация (разделение цепей) : Разделение двух связанных водородными связями дополнительных цепей ДНК на пару одноцепочечных полинуклеотидных молекул в процессе нагрева (от 94 ° C до 96 ° C). ° С)
2. Отжиг (связывание праймера): Температура понижается (45-60 ° C), чтобы праймеры могли прикрепляться к одноцепочечным цепям ДНК.
3. Удлинение (синтез новой ДНК): Начинается с отожженного праймера и продвигается вдоль цепи ДНК (72 ° C).

После завершения первого раунда процесс повторяется, возвращаясь к первой температуре реакции, и начинается следующий раунд денатурации, отжига и удлинения (автоматический процесс в термоциклере) . Этот трехступенчатый температурный цикл повторяется примерно 30 раз, что приводит к экспоненциальной амплификации последовательности целевого гена.

Анимация

Обнаружение продуктов ПЦР

Меченый зонд , который специфичен для последовательности целевого гена, используется для обнаружения продукта гена, амплифицированного ПЦР (также известного как ампликон). В зависимости от природы используемой репортерной молекулы зонд генерирует радиоактивные, колориметрические, флуорометрические или хемилюминесцентные сигналы. Зондовое обнаружение ампликонов служит двум целям

1. Позволяет визуализировать продукт ПЦР
2. Он обеспечивает специфичность, гарантируя, что ампликон является целевой последовательностью, представляющей интерес, а не результатом неспецифической амплификации.

Помимо метода гибридизации на основе ДНК, иногда достаточно простого метода гель-электрофореза для подтверждения наличия определенных ампликонов.

Типы полимеразной цепной реакции-ПЦР

Было разработано несколько модификаций методов ПЦР для повышения полезности этого метода в диагностических настройках на основе их приложений. Некоторые из распространенных типов ПЦР:

1. ПЦР в реальном времени (количественная ПЦР или кПЦР)
2. Обратная транскриптаза (ОТ-ПЦР)
3. Мультиплексная ПЦР
4. Вложенная ПЦР
5. ПЦР высокой точности
6. Быстрая ПЦР
7. ПЦР горячего старта
8. GC-Rich PCR
9. ПЦР дальнего действия
10. ПЦР с произвольным праймированием

Применение ПЦР

• Идентификация и характеристика инфекционных агентов
  • Прямое обнаружение микроорганизмов в образцах от пациентов
  • Идентификация микроорганизмов, выращенных в культуре
  • Обнаружение устойчивости к противомикробным препаратам
  • Исследование штаммовой принадлежности интересующего патогена
• Генетическое снятие отпечатков пальцев (судебно-медицинская экспертиза / тестирование на отцовство)
• Обнаружение мутации (исследование генетических заболеваний)
• Клонирование генов
• Секвенирование ПЦР

Ссылки и дополнительная информация:

• Источник анимации: dnalc.орг
• Источник изображения: Wikipedia.org
• Диагностическая микробиология Bailey & Scott’s — 12-е издание

Связанные

Книжный магазин AWS. D3.9 / D3.9M: Спецификация 2019 для классификации грунтовок для краски для сквозных сварных швов

D3.9 / D3.9M: ТЕХНИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ 2019 ГОДА ДЛЯ КЛАССИФИКАЦИИ ПРАЙМОВ ДЛЯ КРАСКИ ДЛЯ СВАРКИ

Цена для участников: 54 доллара.00

Цена для нечленов: 72,00 $

Настоящая спецификация устанавливает требования к классификации грунтовок для окраски сквозных сварных швов. Классификация основана на толщине пленки краски и методике сварки. Производители могут классифицировать свои продукты по разной толщине пленки или способам сварки, если они предоставят подробные сведения о своих испытаниях. ISBN Print: 978-1-64322-060-4. ISBN PDF: 978-1-64322-061-1

Универсальные праймеры для ПЦР

имеют решающее значение для генотипирования энтеровирусов на основе прямого секвенирования

ПИСЬМО

Я с большим интересом прочитал недавно опубликованную статью Van Leer-Buter et al., Которая применила ПЦР и прямое секвенирование для выявления генотипов энтеровирусов (EV). в больнице третичного уровня (1). Удивительно, но хотя некоторые ЭМ нового вида C были идентифицированы, всего их 8.5% (34/399) обнаруженных ЭМ не удалось генотипировать (1), что не рассматривалось и не обсуждалось авторами. Использование устаревшей классификации генотипов EV и принятие неуниверсальных праймеров для ПЦР привлекли мое особое внимание, и последнее может быть одним из объяснений вышеупомянутого наблюдения. Здесь я хотел бы остановиться на этих двух важных моментах, которые могут повлиять на правильное понимание и анализ результатов, представленных в этой статье.

Во-первых, во вводном разделе, основанном на двух отчетах, опубликованных в 1999 и 2009 годах, Ван Леер-Бутер и его коллеги заявили, что на данный момент признано восемь видов электромобилей (от EV-A до EV-H) (1).Однако с 2013 года Международный комитет по таксономии вирусов классифицировал род EV на 12 видов: от EV-A до EV-H, EV-J и от риновируса A (RV-A) до RV-C (2 ; http://www.picornaviridae.com
). Следует отметить, что во избежание путаницы с номером 1 (один) EV-I был намеренно исключен из новой системы классификации (2; http://www.picornaviridae.com
). Интересно, что, как показано на рис.5 в своей статье, Ван Лер-Бутер и его коллеги включили в свой филогенетический анализ штаммы-прототипы RV-A, -B и -C (1), что может запутать читателей в классификации генотипа EV. принят авторами.

Во-вторых, в разделе «Материалы и методы» Van Leer-Buter et al. предоставили информацию о прямом праймере DK001 и обратном праймере EV-All (TTCTGIGTIGAIACYTGWGCICCCAT), с помощью которых они амплифицировали 5′-нетранслируемую область (5′-UTR) гена VP1 EV (1). Начнем с того, что DK001 (5′-CAAGCACTTCTGTTTCCC-3 ‘) был ранее разработан на основе выравнивания последовательностей RV 1b, 2, 14, 16, 39 и 89 (3). Это предполагает, что этот прямой праймер не будет универсальным праймером для амплификации последовательностей EV различных генотипов, что было подтверждено моим биоинформатическим анализом дивергентных генотипов EV (данные не показаны).Кроме того, другой биоинформатический анализ обратного праймера EV-All (данные не показаны) также продемонстрировал, что его 5′-конец также не является общим для разных генотипов EV, хотя 3’-конец (CCCAT) этого праймера, по-видимому, универсален для разные штаммы. Просто совпадающие с частью генотипов EV, праймеры для ПЦР не будут обладать достаточной чувствительностью и способностью для амплификации последовательностей EV различных известных генотипов, а также потеряют чувствительность для обнаружения неизвестных генотипов EV из образцов пациентов.